技術(shù)文章
Technical articles1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液（0.5mg/kg），第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā)，每天于上午下午固定時間霧化2次，每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化，后一次霧化結(jié)束后24小時，小鼠摘眼球取血，取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實驗取體重200-260g豚鼠，雌雄各半，置于50...
（一）佐劑誘導(dǎo)型（AA）AA早由Freund于20世紀50年代創(chuàng)立，又稱弗氏佐劑關(guān)節(jié)炎，介導(dǎo)溶劑分為*佐劑（CFA）和不*佐劑（IFA）。通常用CFA作介導(dǎo)劑，AA模型在T細胞相關(guān)致炎通路的藥物篩選上發(fā)揮著重要的作用。（二）膠原誘導(dǎo)型（CIA）CIA模型是由Trentham等于1977年*建立的實驗性關(guān)節(jié)炎動物模型。通過皮下注射Ⅱ型膠原和等量CFA的混合液來建造，來源于雞、小牛和大鼠的Ⅱ型膠原均能引起關(guān)節(jié)炎癥。CIA是MHC相關(guān)型，以T/B淋巴細胞介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎癥侵蝕為主要特征...
除了一些安全性評價動物實驗外，我們這里提到的大多數(shù)動物實驗都是整體科學(xué)研究計劃的一個重要組成部分，動物實驗往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進行動物實驗的設(shè)計，我們有對一般科學(xué)實驗的整體設(shè)計進行簡單的論述。廣義來講，科學(xué)研究選題是由社會發(fā)展和人們生活水平?jīng)Q定的(如癌癥和心血管疾病的發(fā)生就和人們所處生活環(huán)境有很大的關(guān)系)；狹義來講，科學(xué)研究的選題是由研究機構(gòu)目標和能力來決定，或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂...
一、WesternBlot實驗為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實驗結(jié)果進行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內(nèi)參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結(jié)果的準確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對照，檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...
ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各...
一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...
MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實驗了，養(yǎng)過細胞的你應(yīng)該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產(chǎn)生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養(yǎng)基的時候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準。當然也...
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點：（1）生物學(xué)實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預(yù)留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體...
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