上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建

一、詳細介紹
        上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是是瞬時轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中、雖然可以達到高水平的表達，但通常只持續(xù)數(shù)天，在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)（依賴各種不同的構(gòu)建手段）分析結(jié)果，常常用到一些報告基因系統(tǒng)如熒光蛋白，β-半乳糖苷酶等來幫助檢測。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則是外源質(zhì)粒DNA整合到宿主細胞染色體上，使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白，需要在瞬時轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對靶細胞進行篩選或者應(yīng)用高轉(zhuǎn)染效率的病毒。建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系時，需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應(yīng)的藥物對靶細胞進行篩選，常見的抗性標志物有潮霉素（hygromycin）、嘌呤霉素（puromycin）和新霉素（neomycin）。篩選得到的細胞能夠穩(wěn)定表達目的蛋白，可以用于目的蛋白的擴增和富集，或者得到穩(wěn)定沉默特定基因的細胞株。

二、服務(wù)項目及周期