月桂酸致大鼠閉塞性脈管炎動(dòng)物模型

(1)復(fù)制方法  體重為280～320g雄性Wistar大鼠，按35mg/kg體重的劑量腹腔注射3％的戊丨巴丨比妥丨鈉麻醉。動(dòng)物仰臥固定分離右股動(dòng)脈，并用動(dòng)脈夾于股動(dòng)脈中段阻斷血液。然后注入月桂酸，注入的總體積為0.2ml。先在動(dòng)脈夾的下方1.0cm處近心端方向注入月桂酸，然后再向股動(dòng)脈遠(yuǎn)心端方向注入余下的月桂酸。注入的標(biāo)準(zhǔn)為血管明顯充盈，略顯白色而無(wú)明顯腫脹時(shí)，注入結(jié)束時(shí)注射器的取出動(dòng)作要輕柔。注入月桂酸15min后打開(kāi)動(dòng)脈夾，復(fù)通血流，并觀察出血和止血情況。待動(dòng)物止血、手術(shù)側(cè)肢體出現(xiàn)明顯改變后可將各層組織逐層縫合。大鼠股動(dòng)脈注入月桂酸后約5min，患側(cè)足爪部皮膚溫度降低，皮膚顏色變蒼白繼而變青紫，動(dòng)脈搏動(dòng)減弱或消失，次日受累的足跖變黑，并逐漸向上發(fā)展，形成壞疽和木乃伊化。少數(shù)動(dòng)物術(shù)后表現(xiàn)為患肢水腫，糜爛及炎癥反應(yīng)。大鼠手術(shù)后均有患肢疼痛、跛行和曳行現(xiàn)象，2周內(nèi)大鼠出現(xiàn)患肢壞疽部分脫落，脫落率為90％。病理檢查發(fā)現(xiàn)，大鼠患肢動(dòng)脈內(nèi)均有不同程度的血栓形成，動(dòng)脈內(nèi)皮出現(xiàn)不同程度的增生，中膜與外膜還出現(xiàn)了明顯的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。該模型的評(píng)價(jià)分為整體評(píng)價(jià)以及病理學(xué)評(píng)價(jià)：整體評(píng)價(jià)主要對(duì)患肢腫脹程度、壞疽和木乃伊化病變程度以及范圍進(jìn)行分級(jí)評(píng)定(0級(jí)：正常；1級(jí)：病變局限于趾甲部；2級(jí)：病變局限于趾部；3級(jí)：病變局限于足爪部；4級(jí)：病變局限于膝關(guān)節(jié)以下；5級(jí)：病變局限于膝關(guān)節(jié)以上)；在病理評(píng)價(jià)方面，將模型致殘大鼠整個(gè)右下肢取下后用10％的甲醛固定，3d后再用10％的硝酸脫鈣。將足趾、踝關(guān)節(jié)上、下及股部4個(gè)部位進(jìn)行橫斷切片，HE染色，每個(gè)標(biāo)本分別取4張四部位切片放在一個(gè)病理切片上，然后在顯微鏡下對(duì)動(dòng)脈血栓情況進(jìn)行分級(jí)(0級(jí)：無(wú)血栓；1級(jí)：1個(gè)血栓；2級(jí)：2～3個(gè)血栓；4級(jí)：4個(gè)以上血栓)，同時(shí)分別對(duì)動(dòng)脈壁炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維增生及血栓肌化與再通等情況進(jìn)行觀察。

(2)模型特點(diǎn)  本模型通過(guò)動(dòng)脈內(nèi)直接注射月桂酸造模，因此模型的成功率較高，方法簡(jiǎn)單，重復(fù)性和穩(wěn)定性都很好，試劑價(jià)廉易得，尤其是通過(guò)這種多部位、半定量的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢查，提高了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)性，結(jié)果可靠。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本模型與采用ZT醫(yī)用膠造模方法相比，造模后術(shù)區(qū)感染率低，切口延期愈合率低，避免了ZT膠這種異體抗原本身的刺激反應(yīng)及其所引起的各種異體抗原炎性反應(yīng)直接造成的對(duì)股動(dòng)脈的壓迫。此模型復(fù)制的動(dòng)物，符合人體TAO病理狀態(tài)下的血管閉塞機(jī)理，其癥狀、體征及病理組織學(xué)改變與臨床TA0患者的改變基本吻合。